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液相色譜儀按分離機(jī)理的分類

更新時間:2013-01-18點(diǎn)擊次數(shù):3220
  液相色譜法按分離機(jī)理的不同可分為以下幾類:
  
  (一)吸附色譜法(adsorptionchromatography)以吸附劑為固定相的色譜方法稱為吸附色譜法。使用zui多的吸附色譜固定相是硅膠,流動相一般使用一種或多種有機(jī)溶劑的混合溶劑。在吸附色譜中,不同的組分因和固定相吸附力的不同而被分離。組分的極性越大、固定相的吸附力越強(qiáng),則保留時間越長。流動相的極性越大,洗脫力越強(qiáng),則組分的保留時間越短。
  
 ?。ǘ┮?液分配色譜法(liquid-liquidchromatography)液-液分配色譜的固定相和流動相是互不相溶的兩種溶劑,分離時,組分溶入兩相,不同的組分因分配系數(shù)(K)的不同而被分離。目前廣泛使用的化學(xué)鍵合固定相是將固定液的官能團(tuán)鍵合在載體上而制成的,使用化學(xué)鍵合固定相的色譜方法(簡稱鍵合相色譜法)可以用分配色譜的原理加以解釋。鍵合相色譜法在HPLC中占有極其重要的地位,是應(yīng)用zui廣的色譜法。按照固定相和流動相極性的不同,分配色譜法又可分為正相色譜法和反相色譜法兩類。
  
  1.正相色譜法(normalphasechromatography)固定相極性大于流動相極性的分配色譜法稱為正相分配色譜法,簡稱為正相色譜法。氰基鍵合硅膠、氨基鍵合硅膠等極性的化學(xué)鍵合固定相是正相色譜常用的固定相,正相色譜的流動相一般為極性較小的有機(jī)溶劑。在正相色譜中,極性小的組分由于K值較小先流出,極性較大的組分后流出。正相色譜法用于溶于有機(jī)溶劑的極性及中等極性的分子型物質(zhì)的分離。
  
  2.反相色譜法(reversedphasechromatography)流動相極性大于固定相極性的分配色譜法稱為反相分配色譜法,簡稱為反相色譜法。反相色譜法使用非極性固定相,zui常用的非極性固定相是十八烷基硅烷鍵合硅膠,還有辛烷基硅烷鍵合硅膠等。流動相常用水與甲醇、乙腈或四氫呋喃的混合溶劑。在反相色譜中極大的組分因K值較小先流出色譜柱,極性較小的組分后流出。流動相中有機(jī)溶劑的比例增加,流動相極性減小,洗脫力增強(qiáng)。反相色譜法是目前應(yīng)用zui廣的液相色譜法。
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